طراحی پرایمرهای اختصاصی بوردتلا پرتوسیس با استفاده از تکنیک real-time pcr و مقایسه حساسیت و ویژگی آن ها با کیت تجاری

زمینه و اهداف: در کشور ما واکسیناسیون سیاه سرفه سال هاست که انجام می شود و در 85% موارد ایمنی کامل به وسیله واکسیناسیون و یا احیاناً ابتلا به بیماری ایجاد گردیده است؛ لذا همه گیری های 5-2 ساله ناشی از شیوع مجدد در بزرگ سالان غیر ایمن است که سبب ابتلا کودکان و شیرخواران می شود. روش real-time pcr با توجه به نواحی ژنومی محافظت شده و میزان اختصاصیت پرایمر مورد استفاده می تواند یک روش جایگزین آسان، ارزان، سریع و با حساسیت بالا باشد. مواد و روش کار: در یک مطالعه کاربردی 170 سوآب نازوفارنژیال از کودکان شیرخوار باسابقه سرفه بیش از 2 هفته به دست آوردیم. در اولین مرحله تشخیص باکتری بوردتلا پرتوسیس با روش کشت و real-time pcr با استفاده از کیت خارجی انجام شد و سپس با پرایمرهای جدید طراحی شده، آزمایش تکرار گردید. یافته ها: عملکرد پرایمرهای مذکور به منظور تشخیص بیماری سیاه سرفه بر اساس یافته های کیت تجاری و راهنمای کلاسیک تشخیصی (who) و (cdc) قابل قبول است. در این پروژه نتایج حاصل از کیت تجاری با روش طراحی شده مطابقت داشته و حداقل کپی قابل تشخیص در این روش 10copies/ml در مقایسه با کیت تجاری که 20copies/ml بود بدست آمد. همچنین در این روش حساسیت و ویژگی100% بدست آمد. نتیجه گیری: آزمون real-time pcr با پرایمرهای جدید، در مقایسه با روش کشت، آزمون تائیدی مناسب تر, با حساسیت، ویژگی و ارزش های اخباری بالاتر برای تشخیص بیماری است. با این روش می توان به تشخیص سریع تر بیماران و درمان آنها پرداخت و از سایر عوارض بیماری جلوگیری کرد.